Premessa
Le cellule endoteliali si trovano all’interfaccia tra sangue e tessuti interstiziali e svolgono un ruolo chiave nell’omeostasi vascolare. Le cellule endoteliali sono in un equilibrio dinamico con l’ambiente e, allo stesso tempo, costituiscono una fonte, una barriera e un bersaglio per i mediatori difensivi.
Sebbene l’infezione delle cellule endoteliali da parte di SARS-CoV-2 sia ancora oggetto di dibattito, stanno emergendo sempre più studi che forniscono spunti meccanicistici a sostegno dell’ipotesi che esista un nuovo meccanismo non infettivo attraverso il quale la proteina spike può legarsi alle cellule endoteliali interagendo con diversi recettori dell’ospite, causando molteplici casi di danno endoteliale. La proteina spike, da sola, sembrerebbe infatti indurre profonde alterazioni nel fenotipo delle cellule endoteliali, aumentando l’espressione di citochine, molecole adesive e specie reattive dell’ossigeno, oltre a compromettere la permeabilità cellulare e le funzioni metaboliche. Le alterazioni del metabolismo mitocondriale nelle cellule endoteliali microvascolari umane causate dalla proteina spike sono state accompagnate da una produzione abbondante del fattore coagulante Xa, con ovvie implicazioni cliniche per lo stato ipercoagulabile.
La proteina spike di SARS-CoV-2 è una proteina di fusione transmembrana di tipo I altamente glicosilata e di grandi dimensioni composta dalle subunità S1 e S2. Tutti i dati disponibili indicano che, tra i diversi componenti della proteina spike, la subunità S1 è la principale responsabile dell’induzione della disfunzione endoteliale. Un meccanismo significativo di danno è di tipo vascolare, ed è mediato dalla proteina spike, un elemento comune della malattia da COVID-19, ed è correlato alla somministrazione di un vaccino contro il COVID-19.
Proteina spike danni all’endotelio: tanti gli studi, soprattutto nel corso di questi ultimi due anni, a sostegno di questa tesi, tra cui: SARS-CoV-2 and the spike protein in endotheliopathy by Luca Perico et al., 2024); The spike protein of SARS-CoV-2 induces endothelial inflammation through integrin α5β1 and NF-κB signaling (by Juan Pablo Robles et al, 2022); SARS-CoV-2 spike protein induces endothelial dysfunction in 3D engineered vascular networks (by Brett Stern et al, 2024); Long‐lasting, biochemically modified mRNA, and its frameshifted recombinant spike proteins in human tissues and circulation after COVID‐19 vaccination (by Laszlo G Boros et al, 2024); Strategies for the Management of Spike Protein-Related Pathology (by M. Halma et al, 2023): quest’ultimo riassume le opzioni terapeutiche note per il COVID-19 prolungato e i danni da vaccino, i loro meccanismi e le loro basi probatorie.
Proteina spike ricombinante
I vaccini COVID-19 di Pfizer e Moderna contengono RNA messaggero (mRNA) modificato che codifica per la glicoproteina spike virale della sindrome respiratoria acuta grave causata dal coronavirus (SARS-CoV-2), somministrato tramite iniezioni intramuscolari. Nonostante il loro utilizzo a livello mondiale, si sa molto poco su come le modifiche a nucleosidi nelle sequenze di mRNA influenzino la loro degradazione, trascrizione e sintesi proteica. Si sperava che le cellule immunitarie residenti e circolanti attratte nel sito di iniezione producessero copie della proteina spike mentre l’mRNA iniettato si sarebbe degradato nel giro di pochi giorni. Si stimava anche originariamente che le proteine spike ricombinanti generate dai vaccini mRNA persistessero nel corpo per alcune settimane. In realtà, gli studi clinici riportano ora che l’mRNA modificato del SARS-CoV-2 persiste abitualmente fino a un mese dall’iniezione e può essere rilevato nel muscolo cardiaco e scheletrico in siti di infiammazione e fibrosi, mentre la proteina spike ricombinante può persistere per poco più di sei mesi nel sangue.
La vaccinazione con mRNA arricchito con 1- metilΨ (pseudouridina) può indurre immunità cellulare agli antigeni peptidici prodotti da frameshifting ribosomiale +1 in persone con complesso maggiore di istocompatibilità diverso. La traduzione dell’mRNA 1- metilΨ utilizzando la cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa ha identificato nove peptidi derivati dal frame +1 dell’mRNA. Questi prodotti influenzano l’immunità delle cellule T dell’ospite fuori bersaglio, che include un aumento della produzione di nuovi antigeni delle cellule B con conseguenze cliniche di vasta portata. Ad esempio, è stato rilevato un aumento altamente significativo dell’assorbimento di 18-fluoro-deossiglucosio nel muscolo cardiaco in pazienti vaccinati fino a sei mesi (180 giorni).
Questo articolo di revisione, Long- lasting, biochemically modified mRNA, and its frameshifted recombinant spike proteins in human tissues and circulation after COVID- 19 vaccination, anno 2024, si concentra sui principi della biochimica medica, della proteomica e della deutenomica che spiegano il fenomeno persistente del picco in circolazione con danni funzionali correlati agli organi anche in individui asintomatici.
Proteina spike ricombinante: cosa cambia
I vaccini anti COVID-19 a mRNA codificano una proteina spike ricombinante legata alla membrana con specifiche variazioni amminoacidiche introdotte per mantenere la proteina in uno stato di prefusione e in una forma non scindibile. La proteina spike prodotta dal vaccino presenta un’importante differenza rispetto alla proteina spike del SARS-CoV-2: l’inclusione di due mutazioni della prolina per stabilizzare lo stato di pre-fusione della proteina spike. Queste sono correlate a BNT162b2 di Pfizer, mRNA-1273 di Moderna, di Johnson & Johnson e NVAX-CoV2373 di NovaVax. Queste doppie mutazioni della prolina presenti nei vaccini a mRNA stabilizzano lo stato pre-fusione, sebbene si verifichi ancora una certa scissione.
A causa di queste modifiche, la biodisponibilità sistemica della proteina spike o delle sue subunità è stata inizialmente esclusa fino a quando uno studio ha riportato che il tempo minimo e massimo in cui è stato rilevato il PP-Spike dopo la vaccinazione è stato rispettivamente di 69 e 187 giorni (Detection of recombinant Spike protein in the blood of individuals vaccinated against SARS-CoV-2: Possible molecular mechanisms). Il potenziale tropismo della proteina spike in diversi organi è stato recentemente testato in vivo, rivelando che il suo assorbimento è più elevato nei polmoni, seguito da cervello e cuore.
I residui di proline e idrossiproline emergono come siti di legame prominenti per il deuterio (idrogeno pesante) nelle proteine strutturali con una robusta stabilità isotopica che resiste non solo alla degradazione enzimatica, ma praticamente a tutti i meccanismi di scissione (non) enzimatica noti in chimica.
Proteina spike ricombinante tempi di decadimento: nuove stime
Gli esami analitici indicano tempi di decadimento significativamente più lunghi sia per l’mRNA iniettato sia per la sua proteina spike ricombinante nei tessuti e nella circolazione. Inoltre, ci sono patologie documentate in pazienti asintomatici riguardo alle immunizzazioni con mRNA. La distribuzione e la persistenza del vaccino mRNA SARS-CoV-2 nei tessuti umani non erano chiare fino a quando specifici saggi basati su reazione a catena della polimerasi trascrizionale inversa quantitativa hanno rilevato il vaccino mRNA nei linfonodi ascellari nella maggior parte dei pazienti, così come nel miocardio in un sottogruppo di pazienti vaccinati entro 30 giorni dalla morte. Questi risultati suggeriscono fortemente che i vaccini mRNA SARS-CoV-2 persistano regolarmente fino a 30 giorni dopo la vaccinazione negli organi linfatici ipsilaterali e possano essere rilevati anche nel cuore.
L’esame della spettrometria di massa dei campioni di sangue umano ha riportato la presenza di frammenti specifici della proteina spike ricombinante dopo la somministrazione di vaccini a base di mRNA nel 50% dei campioni fino a 187 giorni dopo la vaccinazione. I meccanismi suggeriti includono l’integrazione dell’mRNA stabile iniettato nel genoma delle cellule somatiche, che potrebbe portare alla trascrizione e traduzione di una riserva di proteine spike attivamente costitutive. La persistenza continua e il destino incerto delle formazioni di mRNA e spike sono di fondamentale importanza a causa delle patologie morfologiche e funzionali sempre più riportate nella letteratura medica.
RNA messaggero stabile e trasformazione delle cellule eucariote
Gli acidi ribonucleici stabilizzati e poi iniettati, che rimangono in vari tessuti fino a 30 giorni, possono fungere da modelli per la funzione promiscua della trascrittasi inversa della polimerasi del DNA umano theta (Polθ) che causa la trasformazione del DNA coinvolta nella formazione del cancro. Infatti, Polθ (polimerase theta) è altamente soggetta a errori nel portare a termine la sintesi translesionale e promuove l’unione finale microomologia-mediata delle rotture a doppio filamento (DSB) con alta fedeltà dell’RNA. Per i motivi sopra indicati, Polθ è altamente espresso in molte cellule tumorali con significativa aneuploidia e un cattivo esito clinico.
È anche di fondamentale importanza considerare, durante gli sforzi di sviluppo di mRNA modificato iniettabile, che le molecole d’acqua controllano la costante di velocità per l’incorporazione dei nucleotidi nello stato pre-stabile delle polimerasi RNA e DNA, comprese quelle di Polθ. Questo fatto è fondamentale per comprendere meglio come l’isotopo pesante di idrogeno stabile chiamato deuterio (2H-D) trasportato nelle molecole d’acqua di vari compartimenti cellulari stabilizzi i vaccini mRNA con effetti di trasformazione del DNA indesiderati.
Le scoperte sopra menzionate illuminano due fatti basilari relativi alla chimica degli acidi nucleici e al loro uso in medicina: RNA e DNA polimerasi sono inducibili da architetture di acido nucleico di varie origini patogene, esogene e/o endogene; i modelli di RNA e DNA presentano una notevole stabilità conformazionale correlata al 2H-D e resistenza alla degradazione. Ciò avviene, ad esempio, con integrazioni casuali che si verificano frequentemente nei DSB (rotture a doppio filamento) nel genoma.
Emivite e la sicurezza biologica delle specie di RNA nei tessuti umani
La stabilizzazione dell’RNA attraverso modifiche strutturali di base interrompe l’instabilità intrinseca dei modelli di acido ribonucleico messaggero, con conseguenze biologiche di sicurezza di ampia portata. Gli mRNA naturali prodotti trascrizionalmente, comprese le strutture a coda poliadenilata terminate a 5′-capped e/o 3′, mostrano un’emivita di 16,4 h nel sangue umano, che è la più corta tra gli RNA circolari (circRNA; 24,56 ± 5,2 h), gli RNA lunghi non codificanti (lncRNA; 17,46 ± 3,0 h) e i microRNA (miRNA; 16,4 ± 4,2 h).
Per la sicurezza biologica di prevenire traduzioni multiple incontrollate, la degradazione dell’mRNA avviene mediante scissione spontanea della parte zuccherina pentoso tramite i suoi legami fosfodiestere e reazioni di transesterificazione intramolecolare. E’ evidente che lo stato di protonazione o deuterazione del gruppo 2′-idrossile nucleofilo è un fattore critico per la velocità di degradazione dell’RNA. La geometria esatta dei gruppi chimici che compongono ciascun legame internucleotidico ha anche un’influenza importante sull’attività di cleavage. In una vasta gamma di condizioni fisiologiche, la rapida e spontanea degradazione dell’RNA avviene per preservare l’integrità genetica prevenendo l’azione della trascrittasi inversa degli enzimi polimerasi a livello del loro substrato.
Le consegne di massa a livello mondiale di specie di mRNA modificato iniettabile con emivite imprevedibili, alcune vicine a 30 giorni nei tessuti linfatici umani e nel muscolo cardiaco, sollevano gravi interrogativi sulla sicurezza biologica delle terapie con ribonucleotidi traducibili. Gli mRNA sintetici come quelli che esprimono la proteina spike del SARS-CoV-2 sono dotati di cappucci analoghi che inibiscono ulteriormente i meccanismi fisiologici di degradazione e riciclo dell’mRNA negli esseri umani.
mRNA stabili, metabolismo delle cellule tumorali e deuterio
I fattori nutrizionali e ambientali che limitano la plasticità biologica, coerenti con un lento turnover e degrado dell’mRNA, coinvolgono fortemente la chimica dell’acqua intracellulare e la deutenomica. Un recente rapporto conferma il ruolo principale della plasticità dell’acqua intracellulare nella trasformazione tra un fenotipo normale e uno canceroso delle cellule umane con aneuploidia. Mentre le dinamiche delle molecole d’acqua rimangono praticamente inalterate passando da cellule sane a cellule cancerose, l’acqua citoplasmatica strutturata (particolarmente i movimenti rotazionali) subisce una significativa trasformazione plastica durante la transizione da normale a cancerosa. Sono presenti modelli ribonucleotidici stabili nelle cellule cancerose caricate con acqua deuterata, sia tramite attività glicolitica con formazione di acqua metabolica semi-deuterata, sia a causa di danni mitocondriali che compromettono le reazioni di scambio protone 2H-D-depleting nel ciclo di Krebs–Szent–Györgyi durante la fermentazione di Warburg.
Gli effetti isotopici cinetici di 2H-D formano interazioni non covalenti tra biomolecole, inclusi legami idrogeno e interazioni ioniche e di van der Waals. Ad esempio, l’acido aurintricarbossilico inibisce fortemente la ribonucleasi A come inibitore della degradazione dell’mRNA per lo sviluppo di tali vaccini. D’altra parte, nella sua forma deuterata, l’acido aurintricarbossilico si lega facilmente al sito attivo dell’enzima proprio come fa l’RNA, esercitando un effetto inibitorio da 3 a 6 volte sulla degradazione dell’RNA. Questo potrebbe contribuire alla persistenza degli RNA iniettati stabili con durata imprevedibile, mentre le potenziali complicazioni a medio-lungo termine di tali terapie potrebbero essere devastanti nell’uomo.
I deuteroni non solo preservano i modelli di RNA per persistere nei tessuti e/o nella circolazione, ma innescano anche cambiamenti conformazionali nei sottodomini dell’enzima polimerasi, nei siti catalitici e nella funzione, che possono influire negativamente sull’incidenza e sugli esiti del cancro, tra le altre malattie, dopo iniezioni di mRNA stabile.
Lunga persistenza di mRNA iniettato con tossicità per le cellule cardiache
Gli studi clinici riportano che i vaccini mRNA SARS-CoV-2 persistono fino a 30 giorni nei linfonodi e nel muscolo cardiaco in caso di infiammazione, fibrosi e cicatrizzazione dei punti infartuali. I vaccini Spikevax (mRNA-1273, Moderna) e Comirnaty (BNT162b2, Pfizer/Biontech) presentano effetti collaterali cardiovascolari, che per la maggior parte possono essere classificati in base ai loro sintomi clinici come miocardite e/o pericardite. Le complicanze cardiache possono essere causate sia da mRNA-1273 che da BNT162b2.
Più specificamente, l’mRNA-1273 induce aritmie così come contrazioni irregolari associate a transitori di calcio localizzati. Questi indicano un significativo malfunzionamento del recettore rianodinico cardiaco (RyR2) dopo le iniezioni di mRNA-1273. Al contrario, è stata osservata una maggiore attività della proteina chinasi A (PKA) nei cardiomiociti trattati con BNT162b2. Sia il malfunzionamento di RyR2 che l’attivazione sostenuta della PKA possono aumentare significativamente il rischio di eventi cardiaci acuti a causa dell’indebolimento metabolico e inotropo a lungo termine dei cardiomiociti, come dettagliato qui sotto.
DANNI DELLA PROTEINA SPIKE LATENTE SULLA FUNZIONE CARDIACA
Non solo le molecole di mRNA iniettate nei vaccini possono persistere per mesi, ma anche i loro prodotti proteici spike ricombinanti possono rimanere in circolazione per oltre sei mesi (187 giorni). Questo fatto merita un’attenta analisi a causa della potenziale cardiotossicità diretta. I rapporti mostrano un tasso comparabile di miocardite correlata ai vaccini mRNA dopo la seconda dose del vaccino mRNA in 8-27 casi ogni 100.000 individui maschili rispetto a 59-64 casi dopo l’infezione da SARS-CoV-2 (tra i 12 e i 29 anni di età).
Uno studio che includeva 303 pazienti non vaccinati e 700 pazienti vaccinati ha mostrato che i pazienti vaccinati avevano un’assunzione complessiva di 18F-deossiglucosio (FDG) miocardico più elevata, un indicatore di grave insufficienza metabolica del muscolo cardiaco tipicamente a causa di ischemia, indipendentemente dal sesso o dall’età. Inoltre, un’assunzione miocardica di 18F-FDG severamente aumentata è stata osservata nei pazienti sottoposti a imaging dopo la loro seconda vaccinazione con un aumento dei linfonodi ascellari ipsilaterali rispetto ai pazienti non vaccinati. I risultati importanti di questi studi sono (A) l’aumento significativo nel valore medio di assorbimento di deossiglucosio nel muscolo cardiaco (SUV) di circa il 40% e (B) un aumento dell’assorbimento di glucosio è stato rilevato in individui iniettati con mRNA non sintomatici fino a sei mesi (180 giorni) dopo l’ultima iniezione.
Quest’ultima scoperta indica che le vaccinazioni con mRNA non solo causano un’infiammazione miocardica asintomatica, ma l’effetto continua molto tempo dopo la vaccinazione a 6 mesi senza sintomi clinici apparenti. L’aumento del numero di casi clinicamente complessi di complicazioni cardiovascolari con patologie oscure in individui iniettati con mRNA indica chiaramente la necessità di affrontare i meccanismi e le contromisure per migliorare gli esiti con l’imminente sospensione di tali iniezioni.
Rigidità strutturale correlata alla prolina deuterata della proteina spike patogena
L’obiettivo principale di questa revisione è collegare le evidenze relative alla biochimica medica, alla proteomica e alla deutenomica al ruolo patogenetico delle sostituzioni di prolina nella proteina spike ricombinante come siti di legame potenziali per 2H-D (idrogeno pesante) con stabilità isotopica prominente, persistenza e patogenicità. Preparazioni di mRNA iniettabili producono la proteina spike ricombinante a lunghezza completa che differisce dalla proteina spike WT solo per due sostituzioni di amminoacidi adiacenti nelle posizioni 986 e 987, rispettivamente.
In breve, amminoacidi adiacenti lisina e valina vengono sostituiti ciascuno da un amminoacido prolina. Sostituzioni di (idrossi)prolina introdotte da mRNA modificato non solo rendono la digestione della triptasi inefficace per degradare le proteine spike ma sono anche bersagli di accumulo di 2H-D fino a 2,5 volte oltre l’arricchimento naturale di 2H-D in condizioni biologiche estreme. La presenza sostenuta di proteine spike patogene dopo le sostituzioni di prolina deuterata a causa di iniezioni di mRNA modificato con infiammazione locale e/o sistematica latente dovrebbe essere considerata un fattore di rischio nello sviluppo di vaccini per gravi complicanze e morbidità indesiderate a lungo termine.
Il carbonio legato 2H-D della prolina è stabile nelle condizioni di idrolisi acida. L’incorporazione di due residui di prolina supera la resistenza alla degradazione dei peptidi stabilizzati da amidazione o acetilazione, due approcci che vengono utilizzati di routine per stabilizzare i peptidi terapeutici.
Effetto di trasformazione cellulare delle sostituzioni di prolina nella proteina spike
Le sostituzioni di prolina nelle proteine circolanti introducono cambiamenti biologici fondamentali a causa del ripiegamento alterato e della limitata degradazione da reazioni enzimatiche catalizzate da esopeptidasi e endopeptidasi. In una visione semplificata, la prolina interrompe la struttura secondaria delle proteine inibendo la possibilità della catena principale di conformarsi a una conformazione ad alfa-elica o a beta strati. Di conseguenza, la prolina possiede ruoli multisfaccettati nel comportamento cellulare e contribuisce alla progressione di patologie devastanti come la fibrosi e il cancro metastatico.
La prolina diminuisce la capacità delle endopeptidasi, inclusi la tripsina, la chimotripsina, l’elastasi, la termolisina e la pepsina, di scindere i legami peptidici adiacenti. Di conseguenza, le proprietà biologiche della proteina spike ricombinante con sostituzioni vicinali di proline possono comportarsi come piccole proteine ricche di proline con proprietà strutturali spostate verso quelle dell’involucro, che fornisce stabilità strutturale per esercitare funzioni di barriera biologica ed è riconosciuto come un marcatore per la differenziazione terminale delle cellule squamose.
Le proteine ricche di prolina, specialmente le strutture di prolina adiacenti, si trovano raramente nei tessuti non squamosi normali, e la loro espressione aumentata è stata riportata in alcuni tipi di carcinoma non squamoso, come il cancro colorettale, al seno e pancreatico. I peptidi e le proteine ricche di prolina sono coinvolti nella patogenesi della trasformazione cellulare non squamosa che può portare a comportamenti biologici imprevedibili peggiorando la prognosi del cancro. Le neoplasie aggressive assimilano proteine ricche di prolina, come frammenti di collagene, in condizioni di limitazione nutrizionale, in cui per lo più la prolina derivata dalle proteine contribuisce al metabolismo delle cellule tumorali.
L’effetto trasformante cellulare delle proteine spike ricombinanti rappresenta un serbatoio di nutrienti per le cellule tumorali, evidenziando la necessità di rivalutare le sostituzioni di questo amminoacido nello sviluppo di vaccini e farmaci basati su mRNA in futuro.
Il frameshifting durante la trascrizione dell’mRNA attiva l’immunità fuori bersaglio.
Sorprendentemente, si sa molto poco su come le modifiche dei ribonucleotidi influenzino la sintesi proteica, nonostante il loro ampio utilizzo nei vaccini mRNA clinicamente approvati:
- uno studio molto recente ha rilevato che c’è un grande aumento nel +1 frameshifting ribosomiale durante la traduzione dell’mRNA 1-methylΨ (pseudouridina), il quale ha prodotto sia il prodotto in-frame atteso che due bande aggiuntive a un peso molecolare maggiore. Dopo la vaccinazione dei topi con BNT162b2, c’è stata una risposta apparente delle cellule T sia per la proteina spike SARS-CoV-2 in-frame che per i prodotti a frameshift +1;
- i vaccini mRNA SARS-CoV-2 clinicamente approvati hanno anche prodotto +1 frameshifting ribosomiale durante la traduzione dell’mRNA dell’antigene ricombinante, il quale ha facilmente suscitato risposte immunitarie cellulari fuori bersaglio. Lo studio ha trovato che le risposte ai peptidi spike a frameshift +1 erano significativamente aumentate nei topi vaccinati rispetto ai topi non trattati.
In parole più semplici, i preparati a base di mRNA modificato inducono accidentalmente le nostre cellule a creare un gran numero di proteine deformi casuali; nessuno ha idea di quanto gravi possano essere i rischi: l’mRNA modificato confonde i ribosomi, le “macchine” nelle nostre cellule che leggono l’RNA e lo convertono in amminoacidi che poi si trasformano in proteine; la confusione non è sufficiente a impedire al ribosoma di funzionare, ma provoca un “frameshifting”. Una mutazione frameshift è un difetto genetico che provoca la produzione di proteine anormali, spesso non funzionanti. Un errore nella sequenza dell’informazione genetica fa sì che il meccanismo di sintesi proteica della cellula colleghi gli amminoacidi nell’ordine sbagliato. Ad esempio, supponiamo che la catena dell’RNA legga U-G-C-A-G. Il ribosoma dovrebbe produrre l’amminoacido cistina, che codifica U-G-C, e poi spostarsi al codone successivo, iniziando con A. Invece salta la U e produce alanina, che codifica G-C-A. Il frameshifting continuerà nel codone successivo, che inizierà erroneamente con G e non con A. Man mano che gli errori si accumulano, il risultato sarà una proteina che ha poco in comune con la proteina spike prevista.
In un’indagine successiva su 21 individui vaccinati con BNT162b2 e 20 controlli, c’è stata una risposta significativamente più alta di interferone (IFNγ) all’antigene +1 con mutazione del frame nel gruppo del vaccino BNT162b2. Le risposte immunitarie cellulari ai prodotti con shift di frame +1 sono state osservate solo in individui vaccinati con BNT162b2. Questi dati suggeriscono che la vaccinazione con mRNA 1- metilΨ può innescare un’immunità cellulare agli antigeni peptidici prodotti da un frameshifting ribosomiale +1 in soggetti di diversa complessità del complesso principale di istocompatibilità (MHC).
Ulteriori studi per acquisire informazioni sul frameshifting ribosomiale +1 durante la traduzione dell’mRNA 1- metilΨ utilizzando la cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa (LC–MS/MS) hanno identificato una libreria di sei peptidi in-frame e nove peptidi derivati dal frame +1 dell’mRNA. Tutti i peptidi in-frame sono stati mappati alla regione N-terminale della proteina spike, mentre i peptidi mutati +1 sono stati mappati a valle. Questi dati hanno dimostrato che il polipeptide allungato era infatti un prodotto chimera consistente in residui N-terminali in-frame e residui C-terminali mutati +1. Accanto all’impatto sopra descritto sull’immunità delle cellule T ospiti, gli effetti off-target dello spostamento del telaio ribosomiale potrebbero includere un aumento della produzione di nuovi antigeni delle cellule B con conseguenze mediche di vasta portata che spiegano i significativi aumenti clinicamente osservati dell’infiammazione muscolare, o il notevole aumento dell’assorbimento di glucosio delle cellule muscolari cardiache come descritto sopra.
Conclusioni su Proteina Spike danni ai tessuti
Le tendenze nello sviluppo di vaccini e medicinali a base di mRNA ignorano molti principi di base della biochimica medica, della fisiologia, della proteomica e della deutenomica. Anche se gli mRNA trascritti in vitro/vivo che codificano proteine clinicamente importanti hanno ampi potenziali per applicazioni terapeutiche, l’mRNA modificato attraverso la pseudouridinazione e altre modifiche, inclusa la metilazione, non è praticabile per uso clinico a causa della sua natura duratura e potenzialmente permanente e immunostimolante.
Di conseguenza, c’è un aumento della capacità di traduzione dell’mRNA mentre si potrebbe ridurre la sua immunogenicità in vivo. La natura persistente dell’mRNA che codifica per la proteina spike del SARS-CoV-2 fornisce un’esposizione pericolosamente lunga a una dose illimitata di questa proteina patogena, e pertanto, necessita di una rivalutazione per un uso umano continuato. Gli autori di questa revisione hanno fornito la base molecolare per una vasta distribuzione di lesioni, disabilità e decessi risultanti da malattie correlate alla proteina spike, che derivano dall’uso continuato poco avveduto di questi prodotti. Comprendere i meccanismi proteomici e deutenomici sovraordinati sopra, specialmente nella crescita e trasformazione cellulare, è necessario per una valutazione informata scientificamente del rapporto beneficio/rischio di tali vaccinazioni.
Curiosità: l’effetto degradativo della nattochinasi sulla proteina spike di SARS-CoV-2
Questo lo studio di Takashi et al., 2022: Degradative Effect of Nattokinase on Spike Protein of SARS-CoV-2 Il natto è un popolare alimento tradizionale giapponese a base di semi di soia fermentati da Bacillus subtilis var. La nattochinasi si trova nel natto ed è uno dei più importanti enzimi extracellulari prodotti da B. subtilis var. natto. La nattochinasi è composta da 275 amminoacidi ed è di circa 28 kDa. La nattochinasi inattiva l’inibitore dell’attivatore del plasminogeno-1 e aumenta la fibrinolisi. Diminuisce anche i livelli plasmatici di fibrinogeno, fattore VII, citochine e fattore VIII. La nattochinasi ha la più alta potenza di scioglimento del coagulo tra gli anticoagulanti naturalmente noti. Uno studio clinico ha dimostrato che il consumo orale di nattochinasi non era associato ad alcun effetto avverso.
Pertanto, la nattochinasi è ora considerata un enzima efficiente, sicuro ed economico che ha attirato l’attenzione centrale negli studi sui farmaci trombolitici. Inoltre, la nattochinasi è utilizzata nel trattamento di alcuni tumori. L’attività proteasica della nattochinasi contribuisce alla degradazione della proteina S. La nattochinasi ha un effetto degradante non solo sulle proteine S, ma anche su ACE2 nelle cellule ospiti. La nattochinasi possiede la potente attività di degradazione della proteina SARS-CoV-2 S ed è stato anche dimostrato che esercita effetti anti-aterosclerotici, ipolipemizzanti, antipertensivi, antitrombotici, fibrinolitici, neuroprotettivi, antipiastrinici e anticoagulanti. I dati indicano che la nattokinasi e gli estratti di natto hanno effetti potenziali sull’inibizione dell’ingresso delle cellule ospiti da parte di SARS-CoV-2 attraverso la degradazione della proteina S.
N.B.: questo articolo è stato prodotto esclusivamente da traduzioni di testi scientifici qui linkati per una eventuale diretta consultazione.
Dott.ssa Laura Comollo.